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1、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)細(xì)胞形態(tài)圖示。
圖A、B、C、D分別為培養(yǎng)第1、2、3、4天時,顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

2、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

Nuwacell?-VTN包被蛋白連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)細(xì)胞形態(tài)圖示。
圖示別為培養(yǎng)第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic培養(yǎng)。標(biāo)尺:200μm。


3、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

Nuwacell? hiPSC/hESC高效凍存液保存的hiPSC(P13)復(fù)蘇后細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為細(xì)胞復(fù)蘇第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic培養(yǎng)。標(biāo)尺:200μm。

4、電轉(zhuǎn)液效果對比圖片

圖A-圖B:Nuwacell? hPSC細(xì)胞電轉(zhuǎn)液不加入質(zhì)粒18小時后細(xì)胞顯微鏡下圖示。標(biāo)尺:200μm

圖C-圖D:Nuwacell? hPSC細(xì)胞電轉(zhuǎn)液加入質(zhì)粒18小時細(xì)胞顯微鏡下圖示。標(biāo)尺:200μm

5、電轉(zhuǎn)液效果對比圖片

圖A-圖B:Nuwacell? hMSC細(xì)胞電轉(zhuǎn)液不加入質(zhì)粒24小時后細(xì)胞顯微鏡下圖示。標(biāo)尺:200μm

圖C-圖D:Nuwacell?hMSC細(xì)胞電轉(zhuǎn)液加入質(zhì)粒24小時后細(xì)胞顯微鏡下圖示。標(biāo)尺:200μm

6、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

Nuwacell? 科研級hiPSC細(xì)胞株連續(xù)生長形態(tài)圖示。

圖示分別為培養(yǎng)第1、2、3天時顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示。A:RC01001-A;B:RC01001-B。標(biāo)尺:200μm。

7、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

Nuwacell?? 科研級hiPSC 細(xì)胞株A:RC01001-A;B:RC01001-B)表面標(biāo)志物檢測結(jié)果。

上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體。


8、多能基因檢測

Nuwacell?? 科研級 hiPSC 細(xì)胞株( A:RC01001-A;B:RC01001-B)的多能性基因檢測。

上圖為qRT-PCR分析結(jié)果,OCT4與NANOG為細(xì)胞多能基因。



9、基因組穩(wěn)定性檢測

Nuwacell? 科研級hiPSC 細(xì)胞株(?A:RC01001-A;B:RC01001-B的基因組穩(wěn)定性檢測。

RC01001-A:46,XY;RC01001-B:46,XX。結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。


10、分化潛能檢測

Nuwacell?? 科研級hiPSC 細(xì)胞株 A:RC01001-A;B:RC01001-B)?在免疫缺陷小鼠體內(nèi)形成畸胎瘤。

外:外胚層神經(jīng)組織)、軟中:中胚層(軟骨組織)、內(nèi):內(nèi)胚層腸上皮組織),成瘤時間7周。標(biāo)尺:200μm.


11、Blebbistatin傳代hPSC細(xì)胞圖片

終濃度2.5μM的Blebbistatin傳代hiPSC(P18)形態(tài)圖片,使用Nuwacell? hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic培養(yǎng)。
圖示分別為培養(yǎng)第1、2、3天時,顯微鏡下hiPSC形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。







12、Nuwacell? hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例

Nuwacell? ?hPSC Dissociation Buffer 消化 hPSC 示例圖片

(A)EDTA 消化4min;(B)EDTA 消化6min;(C)EDTA 消化8min。標(biāo)尺:200μm


13、原代hMSC分離培養(yǎng)

Nuwacell? ncMission hMSC Medium分離培養(yǎng)的臍帶來源hMSC細(xì)胞DAY?12形態(tài)圖示。?

圖示分別為形成的不同大小hMSC克隆,0.5g臍帶華通氏膠組織/T75培養(yǎng)瓶。標(biāo)尺:200μm。

Nuwacell? ncMission hMSC Medium與對照培養(yǎng)基Commericial A分離培養(yǎng)臍帶hMSC對比圖示。

0.5g臍帶華通氏膠組織/T75培養(yǎng)瓶,統(tǒng)計Day12生成克隆數(shù)(A)、收獲細(xì)胞總量(B)和克隆出現(xiàn)時間(C)

ncMission hMSC Medium原代分離培養(yǎng)hMSC效果顯著優(yōu)于Commericial A。

14、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株細(xì)胞形態(tài)圖示。熒光倒置顯微鏡圖示。

圖A、B為正常傳代DAY 3(P30)細(xì)胞圖示,C、D為單細(xì)胞傳代DAY 8(P30)細(xì)胞圖示。標(biāo)尺:200μm。

15、細(xì)胞GFP陽性率檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株GFP陽性率檢測,GFP陽性率>90%。

EGFP-1為正常傳代DAY 3(P30)細(xì)胞,EGFP-1為單細(xì)胞傳代DAY 8(P30)細(xì)胞。

上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為hiPSC陰性對照;黑線為GFP-hiPSC的GFP陽性率結(jié)果。?

16、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測結(jié)果。

上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體。?

17、細(xì)胞多能基因檢測

Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞多能基因檢測結(jié)果。

上圖為qRT-PCR分析結(jié)果,POU5F1與NANOG為細(xì)胞多能基因。?

18、細(xì)胞染色體核型檢測

Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞核型檢測結(jié)果46,XY。

結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。?

19、細(xì)胞分化潛能檢測

Nuwacell? hiPSC-EGFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞在免疫缺陷小鼠體內(nèi)形成畸胎瘤。標(biāo)尺:100μm。

E、F、G分別為神經(jīng)組織(外胚層)、軟骨組織(中胚層)、腸上皮組織(內(nèi)胚層),成瘤時間8周。?

20、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

連續(xù)傳代培養(yǎng)的Nuwacell? 原代hMSC細(xì)胞P3、P4、P5代DAY?3形態(tài)圖示。
接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養(yǎng)基用量,T25培養(yǎng)瓶連續(xù)培養(yǎng)3天。標(biāo)尺:200μm 。


21、原代hMSC細(xì)胞表面抗體檢測

連續(xù)培養(yǎng)的原代hMSC細(xì)胞(P5)表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)?



22、原代hMSC細(xì)胞三系分化驗證

連續(xù)培養(yǎng)的原代hMSC細(xì)胞(p5)三系分化功能實驗。

A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。?標(biāo)尺:100μm。?


23、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell? hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒分化流程圖。


24、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為分化過程中DAY?1、3、8、14時的細(xì)胞形態(tài)。標(biāo)尺:200μm。




25、hPSC來源MSC細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒分化的MSC細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為hPSC-MSC生長到P1、P3、P6代的細(xì)胞形態(tài)(匯合度80-85%)。標(biāo)尺:200μm。



26、hPSC來源MSC細(xì)胞表面抗體檢測

連續(xù)培養(yǎng)的hPSC-MSC(P3)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)


27、hPSC來源MSC細(xì)胞三系分化潛能檢測

連續(xù)培養(yǎng)的hPSC-MSC(P3)細(xì)胞三系分化功能實驗。

A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標(biāo)尺:200μm。

28、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell?? hPSC-RPE分化試劑盒分化流程圖。

29、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

A:DAY 0(hPSC);? B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);? D:DAY45(Mature RPE)。標(biāo)尺:200μm。


30、hPSC來源RPE細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE細(xì)胞(DAY 45)。

細(xì)胞特異性標(biāo)志物(ZO-1/MiTF)檢測結(jié)果(免疫熒光染色)。標(biāo)尺:200μm。


Nuwacell?? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE(DAY 45)細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測。

ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE細(xì)胞的特異性標(biāo)志物;E:流式細(xì)胞法檢測;F:RT-qPCR檢測。

31、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell?hPSC-類腎器官分化試劑盒分化流程圖。


32、分化DAY 0-8細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為分化第0、4、6、8天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

33、2D分化DAY 8-20細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒2D分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖A、B分別為為2D分化第14、20天時的細(xì)胞形態(tài)圖示,圖C為2D分化第20天時的放大細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。


34、3D分化DAY 8-17細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-類腎器官分化試劑盒3D分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖D為3D分化第13天時的細(xì)胞形態(tài)圖示,圖E、F為3D分化第17天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

35、hPSC來源腎上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物表達檢測

hPSC來源類腎器官(2D分化,DAY 20)特異性標(biāo)志物表達檢測(免疫熒光染色)圖示。

PODXL、CDH1、LTL、PAX8分別為足細(xì)胞、遠端小管、近端小管、腎囊特異性標(biāo)志物(激光掃描共聚焦顯微鏡)。標(biāo)尺:50μm。


36、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell??hPSC-運動神經(jīng)元分化試劑盒分化流程圖。?




37、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-運動神經(jīng)元分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖A、B、C、D分別為分化第4、9、12、30天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

38、hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中細(xì)胞檢測

hPSC來源運動神經(jīng)元分化到DAY 9(MNP)時細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。

Olig2,Tubulin是MNP細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。

hPSC來源運動神經(jīng)元分化到DAY 35時(mMN,成熟運動神經(jīng)元)細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。

CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。


39、hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中特異性標(biāo)志物檢測

A:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中MNP(DAY?0-9)特異性標(biāo)志物(PAX6、OLIG2)檢測結(jié)果。

B:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中pMN(DAY?9-12)特異性標(biāo)志物(ISL1、HB9)檢測結(jié)果。

C:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中mMN(DAY?15-40)特異性標(biāo)志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)檢測結(jié)果。


40、hPSC來源成熟運動神經(jīng)元膜片鉗電生理檢測

hPSC來源成熟運動神經(jīng)元(DAY?30)膜片鉗電生理檢測結(jié)果。

選取符合形態(tài)特征的神經(jīng)元進行膜片鉗測試,可檢測到自發(fā)放電。標(biāo)尺:50μm。



41、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell? hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化流程圖。

42、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經(jīng)元分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示為DAY? 0啟動分化時的hPSC,DAY? 11收獲的mDAP(多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞),

DAY?12維持培養(yǎng)的mDAP,DAY?45的mDAN(成熟多巴胺能神經(jīng)元)。標(biāo)尺:200μm。



43、hPSC來源多巴胺能前體細(xì)胞(mDAP)特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化的mDAP細(xì)胞熒光圖示。

Lmx1a,F(xiàn)oxa2,En1為mDAP的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。


Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化的mDAPs特異性標(biāo)志物檢測。

圖A為RT-qPCR檢測;圖B為流式細(xì)胞法檢測。NKX2.1、DBX1為前腦標(biāo)志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2為中腦標(biāo)志物,GBX2為后腦標(biāo)志物。


44、hPSC來源成熟多巴胺能神經(jīng)元(mDAN)特異性標(biāo)志物和功能檢測

hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 40)細(xì)胞熒光圖示。

TH和Nurr1為成熟mDAN的細(xì)胞特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。

hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 45)多巴胺釋放水平檢測結(jié)果。?

對照組為hPSC細(xì)胞,正常細(xì)胞多巴胺釋放為0-100pg/mL,放射性免疫法檢測。?

45、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

Nuwacell? 間充質(zhì)干細(xì)胞凍存液保存的hMSC復(fù)蘇后形態(tài)圖示。
圖A、B、C分別為P3代培養(yǎng)第1、2天、3天的hMSC形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

46、細(xì)胞形態(tài)圖示

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)形態(tài)圖示。?
圖示分別為hPSC-MSC生長到DAY?1、DAY?2、DAY?3時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm 。

47、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)

48、細(xì)胞三系分化功能檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)三系分化功能實驗。?

A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標(biāo)尺:200μm。

49、hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞復(fù)蘇后DAY?1-DAY?21細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm 。

50、hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)形態(tài)圖示

Nuwacell? ?hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞復(fù)蘇、維持培養(yǎng)與成熟分化形態(tài)圖示。
圖A、B、C分別為hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞(mDAP)復(fù)蘇DAY?1、DAY?2和DAY?4細(xì)胞形態(tài)圖示;
圖D、E、F分別為mDAP分化為成熟多巴胺能神經(jīng)元(mDAN)過程的DAY?1、DAY?9和DAY?30細(xì)胞形態(tài)圖示。?標(biāo)尺:200μm。

51、hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞(mDAP)熒光圖示。

Lmx1a,F(xiàn)oxa2,En1為mDAPs細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。

52、成熟多巴胺能神經(jīng)元(mDAN)特異性標(biāo)志物和功能檢測

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,復(fù)蘇后DAY 25)細(xì)胞熒光圖示。

TH和Nurr1為成熟多巴胺能神經(jīng)元(mDAN)的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。?

53、hPSC-腎元祖細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-腎元細(xì)胞復(fù)蘇及繼續(xù)分化DAY?2-DAY?12的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。?

54、hPSC-腎元祖細(xì)胞分化潛能檢測

Nuwacell? hPSC-腎元祖細(xì)胞2D分化類腎器管特異性標(biāo)志物檢測熒光染色圖示。

PODXL、CDH1、LTL分別為足細(xì)胞、遠端小管、近端小管特異性標(biāo)志物(倒置熒光顯微鏡)。標(biāo)尺:100μm。

55、hPSC-RPE細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? ?hPSC-RPE細(xì)胞復(fù)蘇后DAY1-DAY15細(xì)胞形態(tài)圖示。
DAY8時可見典型RPE細(xì)胞形態(tài),DAY10開始可見明顯黑色素分泌。標(biāo)尺:200μm。

56、hPSC-RPE細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell? hPSC-RPE細(xì)胞(復(fù)蘇后DAY 20)細(xì)胞特異性標(biāo)志物(ZO-1/MiTF)檢測結(jié)果(免疫熒光染色)。標(biāo)尺:200μm。

57、細(xì)胞傳代培養(yǎng)

Nuwacell??ncMission hMSC Medium連續(xù)傳代培養(yǎng)的P3、P4、P5代hMSC細(xì)胞DAY?3形態(tài)圖示。

接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養(yǎng)基用量,T25培養(yǎng)瓶連續(xù)培養(yǎng)3天。標(biāo)尺:200μm 。



Nuwacell? ncMission hMSC Medium與對照培養(yǎng)基Commericial A連續(xù)培養(yǎng)hMSC對比圖示。

接種密度6000/cm2,0.2 mL/cm2培養(yǎng)基用量,T25培養(yǎng)瓶連續(xù)培養(yǎng)3天。細(xì)胞倍增曲線(D)和倍增時間(E)對比。

ncMission hMSC Medium連續(xù)傳代培養(yǎng)hMSC效果顯著優(yōu)于Commericial A。

58、細(xì)胞形態(tài)圖示

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)形態(tài)圖示。?
圖示分別為hPSC-MSC生長到DAY?1、DAY?2、DAY?3時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm 。


59、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)

60、細(xì)胞三系分化功能檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)三系分化功能實驗。

A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標(biāo)尺:200μm。

61、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

Nuwacell? ncMission hMSC Medium連續(xù)培養(yǎng)的hMSC細(xì)胞(P5)表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)?



62、醫(yī)療器械注冊備案信息

Nuwacell? 間充質(zhì)干細(xì)胞凍存液獲得第一類醫(yī)療器械注冊備案資質(zhì)(備案號:皖合械備20180042號)。

63、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncTarget 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)細(xì)胞形態(tài)圖示。
圖A、B、C分別為培養(yǎng)第2、3、4天時hiPSC的形態(tài)圖示,D為培養(yǎng)至第4天時的放大細(xì)胞圖示。標(biāo)尺:200μm。

64、單細(xì)胞傳代圖片

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncTarget 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)單細(xì)胞傳代圖示。

圖E、F、G分別為培養(yǎng)第3、5、7天時,顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

65、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncTarget 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測。
上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體。

66、多能基因檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncTarget 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)多能性基因檢測結(jié)果。
上圖為qRT-PCR分析結(jié)果,POU5F1與NANOG為細(xì)胞多能基因。

67、基因組穩(wěn)定性檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncTarget 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)基因組穩(wěn)定性檢測。

核型:46,XY,分辨率:400帶。結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。



68、hMSC三系分化鑒定

Nuwacell? ncMission hMSC Medium連續(xù)培養(yǎng)的hMSC細(xì)胞(P5)三系分化鑒定:

F:脂肪分化(油紅染色法);G:硬骨分化(茜素紅染色法);H:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標(biāo)尺:200μm 。

hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 42)膜片鉗測試結(jié)果。

選取符合形態(tài)特征的mDA進行膜片鉗測試,可檢測到較穩(wěn)定的2-10Hz的節(jié)律性自發(fā)放電;

在電壓鉗模式下,給以超極化電壓可見緩慢增大的內(nèi)向電流(H電流)。標(biāo)尺:20μm。

69、細(xì)胞核型檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。
結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。

70、細(xì)胞核型檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell??hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。
結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。

71、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell? hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒分化流程圖。


72、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化流程圖。

73、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell??hPSC-運動神經(jīng)元分化試劑盒分化流程圖。?

74、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell?hPSC-類腎器官分化試劑盒分化流程圖。


75、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell???hPSC-RPE分化試劑盒分化流程圖。

76、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經(jīng)元分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示為DAY??0啟動分化時的hPSC,DAY??11收獲的mDAP(多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞),

DAY?12維持培養(yǎng)的mDAP,DAY?45的mDAN(成熟多巴胺能神經(jīng)元)。標(biāo)尺:200μm。

77、hPSC來源多巴胺能前體細(xì)胞(mDAP)特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化的mDAP細(xì)胞熒光圖示。

Lmx1a,F(xiàn)oxa2,En1為mDAP的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。

Nuwacell?? hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化試劑盒分化的mDAPs特異性標(biāo)志物檢測。

圖A為RT-qPCR檢測;圖B為流式細(xì)胞法檢測。NKX2.1、DBX1為前腦標(biāo)志物;Lmx1a、Foxa2、En1、OTX2為中腦標(biāo)志物,GBX2為后腦標(biāo)志物。


78、hPSC來源成熟多巴胺能神經(jīng)元(mDAN)特異性標(biāo)志物和功能檢測

hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 40)細(xì)胞熒光圖示。

TH和Nurr1為成熟mDAN的細(xì)胞特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。

hPSC來源的成熟中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 45)多巴胺釋放水平檢測結(jié)果。?

對照組為hPSC細(xì)胞,正常細(xì)胞多巴胺釋放為0-100pg/mL,放射性免疫法檢測。?

Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,DAY 45)的膜片鉗測試結(jié)果。
選取符合形態(tài)特征的mDAN進行膜片鉗測試,可檢測到較穩(wěn)定的2-10Hz的節(jié)律性自發(fā)放電。標(biāo)尺:20μm。

79、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-運動神經(jīng)元分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖A、B、C、D分別為分化第4、9、12、30天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

80、hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中細(xì)胞檢測

hPSC來源運動神經(jīng)元分化到DAY 9(MNP)時細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。

Olig2,Tubulin是MNP細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。

hPSC來源運動神經(jīng)元分化到DAY 35時(mMN,成熟運動神經(jīng)元)細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。

CHAT,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。

81、hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中特異性標(biāo)志物檢測

A:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中MNP(DAY?0-9)特異性標(biāo)志物(PAX6、OLIG2)檢測結(jié)果。

B:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中pMN(DAY?9-12)特異性標(biāo)志物(ISL1、HB9)檢測結(jié)果。

C:hPSC來源運動神經(jīng)元分化過程中mMN(DAY?15-40)特異性標(biāo)志物(CHAT、MAP2、Synapyophysin)檢測結(jié)果。

82、hPSC來源成熟運動神經(jīng)元膜片鉗電生理檢測

hPSC來源成熟運動神經(jīng)元(DAY?30)膜片鉗電生理檢測結(jié)果。

選取符合形態(tài)特征的神經(jīng)元進行膜片鉗測試,可檢測到自發(fā)放電。標(biāo)尺:50μm。

83、分化DAY 0-8細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為分化第0、4、6、8天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

84、2D分化DAY 8-20細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒2D分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖A、B分別為為2D分化第14、20天時的細(xì)胞形態(tài)圖示,圖C為2D分化第20天時的放大細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

85、3D分化DAY 8-17細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell???hPSC-類腎器官分化試劑盒3D分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖D為3D分化第13天時的細(xì)胞形態(tài)圖示,圖E、F為3D分化第17天時的細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

86、hPSC來源腎上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物表達檢測

hPSC來源類腎器官(2D分化,DAY 20)特異性標(biāo)志物表達檢測(免疫熒光染色)圖示。

PODXL、CDH1、LTL分別為足細(xì)胞、遠端小管、近端小管特異性標(biāo)志物(倒置熒光顯微鏡)。標(biāo)尺:100μm。


87、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

A:DAY 0(hPSC);? B:DAY 6(RPE progenitors);C:DAY 16(Immature RPE);? D:DAY45(Mature RPE)。標(biāo)尺:200μm。

88、hPSC來源RPE細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測

Nuwacell? hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE細(xì)胞(DAY 45)。

細(xì)胞特異性標(biāo)志物(ZO-1/MiTF)檢測結(jié)果(免疫熒光染色)。標(biāo)尺:200μm。


Nuwacell???hPSC-RPE分化試劑盒分化的RPE(DAY 45)細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測。

ZO-1/MiTF/RPE65/BEST1/MERTK/PEDF是成熟RPE細(xì)胞的特異性標(biāo)志物;E:流式細(xì)胞法檢測;F:RT-qPCR檢測。

89、支持hPSC細(xì)胞生長圖示

Nuwacell? ncLaminin511E8F鋪底的hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P30,DAY8)單細(xì)胞傳代圖示。標(biāo)尺:200μm。

90、ncB27無血清添加劑支持神經(jīng)細(xì)胞生長

Nuwacell? ncB27無血清添加劑支持培養(yǎng)的hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞(mDAP)形態(tài)圖示。
上圖分別為hPSC-mDAP生長DAY1、2、3、5細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

Nuwacell? ncB27無血清添加劑支持培養(yǎng)的hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞(mDAP,DAY4)熒光圖示。
Lmx1a,F(xiàn)oxa2為mDAP的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色檢測。標(biāo)尺:200μm。

91、分化詳細(xì)流程圖

Nuwacell??hPSC-微血管內(nèi)皮細(xì)胞分化流程圖。

92、hPSC-血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)圖示

hPSC分化的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC,P2)形態(tài)圖示。
圖示分別為hPSC-EC生長DAY1、2、3細(xì)胞形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

93、hPSC-血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物檢測

hPSC分化的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC,P2)免疫熒光染色圖示。
UEA-1和CD31為微血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物。標(biāo)尺:200μm。

hPSC分化的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC,P2)免疫熒光染色圖示。
hPSC-血管內(nèi)皮細(xì)胞表達VE-cadherin(血管內(nèi)皮鈣粘蛋白)而不表達α-SMA(α-平滑肌肌動蛋白)。標(biāo)尺:200μm。

hPSC分化的微血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC,P2)特異性標(biāo)志物檢測。
CD31和CD144是血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,流式細(xì)胞法檢測。標(biāo)尺:200μm。

96、hiPSC電轉(zhuǎn)效果示例

Nuwacell? hiPSC/hESC高效電轉(zhuǎn)液轉(zhuǎn)染hiPSC示例:

把2μg表達EGFP的pPBmPNEE的質(zhì)粒 (~6.5kb)電轉(zhuǎn)入hiPSC,轉(zhuǎn)染后24小時使用流式細(xì)胞儀檢測EGFP陽性細(xì)胞。

A:電轉(zhuǎn)時未加入質(zhì)粒的陰性對照;B:電轉(zhuǎn)時加入pPBmPNEE質(zhì)粒。轉(zhuǎn)染效率可達85.43%。




97、產(chǎn)品效果示例

使用Nuwacell??hiPSC/hESC高效電轉(zhuǎn)液轉(zhuǎn)染制備的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株細(xì)胞形態(tài)圖示。
圖C、D為hiPSC-Luc-GFP(P32)培養(yǎng)DAY 3細(xì)胞圖示。標(biāo)尺:100μm。

98、單細(xì)胞傳代圖片

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)單細(xì)胞傳代圖示。

圖A、B、C分別為培養(yǎng)第1、5、10天時,顯微鏡下hiPSC的形態(tài)圖示。標(biāo)尺:200μm。

99、原代hMSC細(xì)胞核型檢測

連續(xù)培養(yǎng)的原代hMSC細(xì)胞(P5)染色體核型檢測。核型:46,XY,分辨率:400帶。
結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。


100、hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞熒光染色圖示

Nuwacell? hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞(MNP)特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。
Olig2,Tubulin是MNP的細(xì)胞特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。?

101、重編程hiPSC克隆形成圖示

外周血重編程-hiPSC克隆形成階段細(xì)胞形態(tài)圖示。

中盛溯源在重編程建系上有著豐厚的經(jīng)驗和技術(shù)實力,每次重編程可獲得上百個細(xì)胞克隆;

如上圖所示一個視野下?lián)碛?0個hiPSC克隆出現(xiàn),大量的克隆出現(xiàn)保證了重編程的高成功率。標(biāo)尺:200μm。


102、細(xì)胞敲入基因信息

Nuwacell? 科研級hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株Rosa 26 位點敲入基因信息示意圖。




Nuwacell??hPSC-多巴胺能神經(jīng)前體細(xì)胞分化為成熟的中腦多巴胺能神經(jīng)元(mDAN,復(fù)蘇后DAY 33)的膜片鉗測試結(jié)果。
選取符合形態(tài)特征的mDAN進行膜片鉗測試,可檢測到較穩(wěn)定的2-10Hz的節(jié)律性自發(fā)放電。標(biāo)尺:20μm。

Nuwacell? ncLaminin511E8F支持多種多能干細(xì)胞(hPSC)的生長。?標(biāo)尺:200μm。

上圖分別為RC01001-A、RC01001-B、H9和NCB19001生長至DAY4細(xì)胞形態(tài)圖示,Nuwacell? hiPSC/hESC培養(yǎng)基-ncEpic培養(yǎng)。

103、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測。
上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體。

104、重編程后hiPSC克隆形態(tài)圖示

外周血重編程初始階段及擴增后的hiPSC克隆形態(tài)圖示。

圖A、B為重編程初始hiPSC克隆和擴增后的hiPSC克隆。標(biāo)尺:200μm

105、成熟hPSC-運動神經(jīng)元熒光染色圖示

Nuwacell? hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞繼續(xù)分化的成熟運動神經(jīng)元(mMN,復(fù)蘇后DAY 26)特異性標(biāo)志物檢測結(jié)果。
MAP2,βⅢ-Tubulin是mMN的特異性標(biāo)志物,免疫熒光染色圖示。標(biāo)尺:50μm。

106、細(xì)胞形態(tài)與生長情況

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞形態(tài)圖示。熒光倒置顯微鏡圖示。
圖A、B為正常傳代DAY 2細(xì)胞圖示,C、D為正常傳代DAY 3細(xì)胞圖示。標(biāo)尺:100μm。



108、分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示

Nuwacell? hPSC-間充質(zhì)干細(xì)胞分化試劑盒分化過程中細(xì)胞形態(tài)圖示。

圖示分別為分化過程中DAY?1、3、8、14時的細(xì)胞形態(tài)。標(biāo)尺:200μm。

不同鋪底基質(zhì)進行hiPSC單細(xì)胞傳代細(xì)胞貼壁效果對比。6孔板,1000cells/孔hiPSC接種,統(tǒng)計DAY6生長克隆數(shù)。
Nuwacell? ncLaminin511E8F顯著優(yōu)于其他鋪底基質(zhì)。

109、多能基因檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)多能性基因檢測結(jié)果。
上圖為qRT-PCR分析結(jié)果,OCT4與NANOG為細(xì)胞多能基因。

110、細(xì)胞GFP陽性率檢測

連續(xù)培養(yǎng)的Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)GFP陽性率檢測,GFP表達陽性。
上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為hiPSC陰性對照;黑線為hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株的GFP陽性率結(jié)果。

111、成熟運動神經(jīng)元功能檢測

Nuwacell??hPSC-運動神經(jīng)元前體細(xì)胞繼續(xù)分化的成熟運動神經(jīng)元(mMN,復(fù)蘇后DAY 21)膜片鉗電生理檢測結(jié)果。
選取符合形態(tài)特征的神經(jīng)元進行膜片鉗測試,可檢測到自發(fā)放電。標(biāo)尺:50μm。

112、hPSC來源MSC細(xì)胞表面抗體檢測

連續(xù)培養(yǎng)的hPSC-MSC(P3)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測:

CD73 + / CD90 + / CD105 +,CD14-/ CD34- / CD45- / CD79α-/ HLA-DR-。

(上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為MSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體)

113、支持神經(jīng)元生長細(xì)胞圖示

Nuwacell? ncLaminin511E8F鋪底的連續(xù)培養(yǎng)的hPSC-運動神經(jīng)元細(xì)胞圖示。標(biāo)尺:200μm。

114、基因組穩(wěn)定性檢測

hiPSC/hESC 培養(yǎng)基-ncEpic 連續(xù)培養(yǎng)的hiPSC(P20)基因組穩(wěn)定性檢測。核型:46,XX,分辨率:400帶。

結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。



115、細(xì)胞熒光素酶(Luciferase)活性檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)熒光素酶(Luciferase)活性檢測結(jié)果。
上圖為RLU(相對熒光強度)分析結(jié)果,其中陰性對照為普通hiPSC,hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)的熒光素酶(Luciferase)報告基因表達陽性。


116、hPSC來源MSC細(xì)胞三系分化潛能檢測

連續(xù)培養(yǎng)的hPSC-MSC(P3)細(xì)胞三系分化功能實驗。

A:脂肪分化(油紅染色法)B:硬骨分化(茜素紅染色法)C:軟骨分化(阿利新蘭染色法)。標(biāo)尺:200μm。

117、細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測結(jié)果。

上圖為流式細(xì)胞分析結(jié)果,其中淺灰色線條為同種抗體陰性對照,黑線為hiPSC細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體。

118、細(xì)胞多能基因檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞多能基因檢測結(jié)果。

上圖為qRT-PCR分析結(jié)果,POU5F1與NANOG為細(xì)胞多能基因。

120、細(xì)胞染色體核型檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞核型檢測結(jié)果46,XY。

結(jié)果解釋:G顯帶,計數(shù)20個分裂相,核型分析5個,未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。

121、細(xì)胞分化潛能檢測

Nuwacell? hiPSC-Luc-GFP細(xì)胞株(P30)細(xì)胞在免疫缺陷小鼠體內(nèi)形成畸胎瘤。

E、F、G分別為神經(jīng)組織(外胚層)、軟骨組織(中胚層)、腸上皮組織(內(nèi)胚層),成瘤時間8周。標(biāo)尺:100μm。